ZCCHC14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411686

Visão geral

ZCCHC14 codifica uma proteína nuclear do tipo dedo de zinco CCHC, implicada em funções de ligação a RNA que influenciam a regulação gênica pós-transcricional, incluindo a estabilidade e o processamento do RNA. Ela tem sido associada a vias que governam o metabolismo de RNA e o controle de programas de expressão gênica que moldam a homeostase celular. Evidências emergentes conectam a ZCCHC14 a interações vírus–hospedeiro, o que é consistente com papéis de fatores de ligação a zinco associados ao RNA na regulação do uso de RNA viral e das respostas do transcriptoma do hospedeiro. A desregulação de proteínas ligantes de RNA e de redes de processamento de RNA é amplamente relevante para a sinalização oncogênica e para transições de estado celular, tornando a ZCCHC14 um alvo útil para estudos mecanísticos nesses contextos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZCCHC14 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZCCHC14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZCCHC14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZCCHC14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZCCHC14.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZCCHC14 para a investigação da sinalização de ZCCHC14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZCCHC14 críticos para a função ZCCHC14
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZCCHC14 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ZCCHC14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ZCCHC14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZCCHC14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ZCCHC14 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ZCCHC14 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZCCHC14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZCCHC14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.