Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ZBP1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-425482-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- ZBP1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- ZBP1ダブルニカースプラスミド（m）およびZBP1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Zbp1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: ZBP1 抗体 (H-9): sc-271483
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
ZBP1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-425482-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZBP1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-425482-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
マウスのZbp1は、Z型核酸に結合する細胞質内核酸センサーであり、自然免疫のアダプターとして機能するZBP1（DAIとしても知られる）をコードします。ウイルス由来または内因性の核酸を感知すると、ZBP1はRIPK3などのシグナル伝達分子と連携して、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）プログラムと炎症応答を促進し、ネクロプトーシスを含む制御された細胞死経路にも結び付き得ます。I型インターフェロンシグナル、NF-κB活性化、インフラマソーム関連過程とのクロストークを通じて、ZBP1は抗ウイルス制限機構や組織の炎症状態（炎症トーン）の形成に寄与します。ZBP1シグナルの破綻は、感染時の過剰炎症や免疫病理、さらに炎症性疾患および神経免疫疾患モデルにおける病態形成に関与するとされており、自然免疫の機構解析に有用な標的となっています。
ZBP1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Zbp1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Zbp1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Zbp1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Zbp1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。