ZAR1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406501

개요

ZAR1(zygote arrest 1)는 RNA 결합 단백질을 암호화하며, 특히 초기 배아발생에서의 역할로 잘 알려져 있습니다. 이 단백질은 난자에서 접합자로의 전환(oocyte-to-zygote transition)과 모계 mRNA의 전사 후(post-transcriptional) 조절을 지원합니다. 인간 세포에서 ZAR1은 mRNA 안정성/번역 조절 및 세포질 리보핵단백질(ribonucleoprotein) 과립의 동역학 조절과 연관되어 있으며, 이러한 과정은 세포주기 진행과 발생 역량(developmental competence)을 형성합니다. 모계효과(maternal-effect) 및 생식세포 계열(germline) 관련 RNA 조절 인자의 발현 변화 또는 조절 이상은 모델 시스템에서 불임 표현형과 발생 실패와 연관되어 보고되어 왔기 때문에, ZAR1은 생식생물학 및 초기 발생 경로 연구에서 중요한 표적입니다. 또한 모계에서 풍부하게 존재하는 인자로서 ZAR1은 RNA 조절 네트워크가 스트레스 반응 및 분화 프로그램과 어떻게 교차하는지 탐구할 수 있는 다루기 좋은(tractable) 연구 지점을 제공합니다.

ZAR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ZAR1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ZAR1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ZAR1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ZAR1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ZAR1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ZAR1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ZAR1 기능에 중요한 ZAR1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ZAR1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ZAR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ZAR1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ZAR1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ZAR1 HDR 플라스미드 (h) 및 ZAR1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ZAR1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ZAR1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.