Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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ZAG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419279
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZAG O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ZAG, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ZAG Anticorpo (F-6): sc-271957
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZAG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419279 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Azgp1 codifica a zinc-α2-glicoproteína (ZAG), uma glicoproteína secretada do tipo adipocina, expressa em múltiplos tecidos, que contribui para a mobilização sistêmica de lipídios e o equilíbrio energético. Em redes metabólicas de camundongos, a ZAG tem sido associada à regulação da lipólise em adipócitos, à modulação do uso de ácidos graxos e ao diálogo cruzado com vias de sinalização inflamatória nos microambientes do tecido adiposo e do fígado. Alterações na expressão de Azgp1/ZAG são frequentemente estudadas no contexto de disfunção metabólica associada à obesidade e de mudanças na sensibilidade à insulina, bem como de fenótipos mais amplos relacionados à caquexia e à inflamação. Como fator circulante e associado à matriz extracelular, a ZAG também é relevante em investigações sobre remodelamento tecidual e comunicação intercelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZAG (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Azgp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Azgp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Azgp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZAG.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Azgp1 para a investigação da sinalização de ZAG, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Azgp1 críticos para a função ZAG
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Azgp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ZAG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ZAG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Azgp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ZAG Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ZAG (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Azgp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Azgp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.