Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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XPF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401692-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- XPFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase XPF (h) e o Plasmídeo Double Nickase XPF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ERCC4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:XPF Anticorpo (F-11): sc-398032
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
XPF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401692-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
XPF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401692-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERCC4 codifica a endonuclease XPF específica para estruturas, que forma um heterodímero com ERCC1 para catalisar incisões em 5′ em lesões no DNA e em intermediários de DNA ramificados. Esse complexo é essencial para o reparo por excisão de nucleotídeos (NER) de adutos volumosos, participa do reparo de ligações cruzadas intercadeias (interstrand crosslinks) na rede da anemia de Fanconi e contribui para o processamento de forquilhas de replicação estagnadas. A atividade de XPF ajuda a manter a estabilidade do genoma ao coordenar o reconhecimento da lesão, a incisão e as etapas subsequentes de síntese durante o reparo. Defeitos na função de ERCC4 estão ligados a respostas deficientes a danos no DNA e se associam a sensibilidade à radiação UV e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia do câncer e para doenças hereditárias de reparo do DNA.
XPF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ERCC4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ERCC4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ERCC4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ERCC4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.