Wnt-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423720
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wnt-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Wnt-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wnt-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423720 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Wnt6 codifica a Wnt-6, uma glicoproteína secretada que atua como um morfógeno de curto alcance na sinalização Wnt, regulando a especificação do destino celular, a proliferação, a polaridade e o padrão de organização dos tecidos durante a embriogênese e a homeostase no adulto. Em sistemas murinos, a Wnt-6 pode interagir com complexos receptores Frizzled/LRP para modular a transcrição canônica dependente de β-catenina, bem como vias não canônicas que influenciam a remodelação do citoesqueleto e a migração direcional. Alterações na atividade de Wnt6 perturbam programas de desenvolvimento e a sinalização epitélio–mesênquima, processos frequentemente estudados em modelos de organogênese, regeneração e biologia do câncer. A desregulação da sinalização Wnt está amplamente implicada em defeitos congênitos e na reprogramação de vias associada a tumores, tornando Wnt6 um nó relevante para a investigação mecanística de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Wnt6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Wnt6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Wnt6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Wnt6 para a investigação da sinalização de Wnt-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Wnt6 críticos para a função Wnt-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Wnt6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Wnt-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Wnt-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Wnt6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Wnt-6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Wnt6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Wnt6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.