Wnt-5a Lentiviral Activation Particles (m): sc-423718-LAC

マウスWnt5aは、分泌性糖タンパク質であるWnt-5aをコードしており、非カノニカルWnt経路を優先的に介してシグナル伝達を行い、組織パターニング、細胞極性、方向性移動を制御します。Wnt-5aはROR2や特定のFrizzledファミリー受容体などと相互作用し、平面内細胞極性（PCP）やCa2+依存性シグナル伝達を調節し、その下流で細胞骨格リモデリングや低分子量GTPase活性に影響を及ぼします。多くの状況において、β-カテニン/TCFによる転写プログラムに拮抗する、あるいはそれを再編成し、発生過程および成体の組織恒常性にわたって分化と形態形成を協調させます。Wnt5aシグナルの破綻は、炎症性微小環境、異常な間質—上皮間コミュニケーション、浸潤表現型の変化と関連づけられており、がん生物学、線維化、免疫シグナルのモデルで頻繁に研究される重要なノードとなっています。

Wnt-5a レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なWnt5aの発現上昇を可能にします。

Wnt-5a レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Wnt5a転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性Wnt-5aの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のWnt5aゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。