Wnt-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401936
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wnt-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Wnt-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wnt-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401936 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
WNT3 codifica a glicoproteína secretada Wnt-3, um ligante canônico de Wnt que ativa os receptores Frizzled/LRP para estabilizar a β-catenina e modular a transcrição dependente de TCF/LEF. Essa sinalização controla o padrão embrionário, a manutenção de células-tronco e progenitoras e a regulação de programas de proliferação e diferenciação em múltiplos tecidos. A atividade aberrante de WNT3/Wnt-3 perturba a saída da rede Wnt/β-catenina e se cruza com vias que governam a dinâmica epitélio–mesênquima, a especificação do destino celular e a homeostase tecidual. A desregulação da sinalização associada a Wnt-3 tem sido implicada em anormalidades do desenvolvimento e em estados transcricionais relevantes para doenças, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WNT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WNT3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WNT3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WNT3 para a investigação da sinalização de Wnt-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WNT3 críticos para a função Wnt-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WNT3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Wnt-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Wnt-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WNT3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Wnt-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WNT3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WNT3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.