WDR24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407847
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WDR24 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico WDR24, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WDR24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407847 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
WDR24 codifica uma proteína contendo repetições WD que atua como componente central do complexo GATOR2, um regulador-chave do controle, dependente da detecção de aminoácidos, da sinalização de mTORC1. Ao modular a atividade do GATOR1, WDR24 ajuda a coordenar a disponibilidade de nutrientes com a ativação lisossomal de mTORC1, impactando a autofagia, a síntese proteica e programas de crescimento celular. A perturbação desse eixo pode alterar a homeostase metabólica e as respostas ao estresse, conectando vias associadas a WDR24 a mecanismos frequentemente estudados no metabolismo do câncer, na neurobiologia e em outros contextos em que a desregulação de mTORC1 está implicada. Assim, WDR24 é relevante para dissecar o circuito de sinalização de nutrientes e seus efeitos transcricionais e traducionais a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO WDR24 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WDR24 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WDR24, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WDR24 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína WDR24.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WDR24 para a investigação da sinalização de WDR24, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WDR24 críticos para a função WDR24
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WDR24 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo WDR24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo WDR24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WDR24. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo WDR24 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR WDR24 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WDR24 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WDR24 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.