VPS51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410709
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPS51 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VPS51, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPS51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410709 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
VPS51 codifica uma subunidade central do complexo de ancoragem GARP (Golgi-associated retrograde protein), associado ao Golgi, que medeia o tráfego retrógrado de endossomos para a rede trans-Golgi (TGN). Ao promover a captura de vesículas e a fusão dependente de SNAREs na TGN, o VPS51 ajuda a manter a organização do Golgi e sustenta a reciclagem adequada de receptores de triagem e proteínas de carga. A disrupção da função do GARP perturba a homeostase endolisossomal, a triagem proteica e vias de maturação dependentes de glicosilação, com efeitos a jusante nas respostas celulares ao estresse. Alterações no tráfego retrógrado são relevantes em modelos de neurobiologia, sinalização imune e fenótipos proliferativos, nos quais a integridade do transporte de membrana influencia a disponibilidade de receptores e os desfechos de sinalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VPS51 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene VPS51 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do VPS51, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do VPS51 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VPS51.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de VPS51 para a investigação da sinalização de VPS51, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) VPS51 críticos para a função VPS51
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos VPS51 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VPS51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo VPS51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus VPS51. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VPS51 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR VPS51 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia VPS51 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo VPS51 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.