VPS13A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407168-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPS13AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VPS13A (h) e o Plasmídeo Double Nickase VPS13A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VPS13A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPS13A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VPS13A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VPS13A codifica uma grande proteína periférica de membrana que se localiza em sítios de contato entre organelas e dá suporte ao transporte de lipídios e à homeostase de membranas, com papéis já estabelecidos no tráfego endossomal, na autofagia e na função mitocondrial. Em neurônios e outras células metabolicamente ativas, a VPS13A contribui para a manutenção da morfologia e da distribuição intracelular das organelas ao coordenar a troca de lipídios e eventos de remodelamento de membranas. A disrupção de VPS13A perturba as respostas ao estresse celular e a dinâmica de vesículas, tornando-a um nó-chave para o estudo da biologia dos sítios de contato de membranas e das vias de controle de qualidade de organelas. Variantes com perda de função estão associadas a fenótipos neurodegenerativos, oferecendo um arcabouço relevante para doenças para estudos mecanísticos em modelos de células humanas.
VPS13A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VPS13A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VPS13A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VPS13A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VPS13A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.