Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
V-ATPase A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400975-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- V-ATPase A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase V-ATPase A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase V-ATPase A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATP6V0A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:V-ATPase A1 Anticorpo (E-8): sc-374475
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
V-ATPase A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400975-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
V-ATPase A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400975-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP6V0A1 codifica a isoforma a1 da subunidade a do domínio V0 da H\+-ATPase vacuolar (V-ATPase), uma bomba de prótons multissubunidade que acidifica endossomos, lisossomos e vesículas secretoras. A acidificação de organelos impulsionada pela V-ATPase sustenta a endocitose mediada por recetor, a degradação lisossomal, a autofagia e o tráfego vesicular, e influencia a sinalização do mTORC1 e a deteção celular de nutrientes através da função lisossomal. Ao controlar o pH luminal, a V-ATPase A1 também contribui para a proteostase e para eventos de fusão de membranas necessários a uma triagem eficiente de carga. A desregulação da atividade da V-ATPase e da acidificação endolisossomal tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, a alterações da função sináptica e a defeitos mais amplos na homeostase celular relevantes para mecanismos de doença.
V-ATPase A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATP6V0A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATP6V0A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATP6V0A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATP6V0A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.