UTX Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423635-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UTXO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UTX (m) e o Plasmídeo Double Nickase UTX (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Kdm6a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UTX Anticorpo (E-8): sc-514859
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UTX Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423635-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UTX Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423635-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Kdm6a de camundongo codifica a UTX, uma desmetilase de histonas com domínio JmjC que remove marcas repressoras de H3K27me3 para promover a ativação transcricional. A UTX atua no remodelamento da cromatina e na regulação de genes do desenvolvimento, coordenando programas de especificação de linhagens e um amplo controle epigenético da identidade celular. Ela participa da regulação de enhancers e promotores por meio de interações com complexos do tipo COMPASS e outros reguladores transcricionais, conectando a dinâmica de modificações de histonas à diferenciação e à proliferação. A desregulação de estados de cromatina dependentes de Kdm6a/UTX tem sido associada a trajetórias de desenvolvimento alteradas e a programas transcricionais oncogênicos, tornando-o um modelo útil para estudos de epigenética e de vias relevantes para doenças.
UTX O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Kdm6a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Kdm6a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Kdm6a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Kdm6a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.