USP9X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402285
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP9X O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico USP9X, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP9X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402285 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
USP9X codifica uma protease específica de ubiquitina que regula a estabilidade proteica ao remover cadeias de ubiquitina de substratos-chave, moldando a proteostase e a intensidade da sinalização. Tem sido associada ao controlo da sobrevivência celular e das respostas ao stress por meio da modulação de vias como a sinalização de NF-κB, redes de resposta a danos no DNA e processos relacionados com o tráfego de membranas. Ao influenciar a degradação de proteínas reguladoras e de componentes do sistema ubiquitina–proteassoma, a USP9X afeta a progressão do ciclo celular, a apoptose e programas de diferenciação. A atividade ou expressão desregulada de USP9X tem sido associada a uma homeostase de sinalização alterada em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo a biologia do cancro e fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP9X (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene USP9X em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do USP9X, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do USP9X na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP9X.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de USP9X para a investigação da sinalização de USP9X, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) USP9X críticos para a função USP9X
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos USP9X para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo USP9X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo USP9X Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus USP9X. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo USP9X Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR USP9X (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia USP9X para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo USP9X definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.