USP51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414805

Visão geral

O USP51 codifica uma protease específica de ubiquitina que participa da desubiquitinação, uma etapa regulatória fundamental que controla a estabilidade, a localização e a saída de sinalização das proteínas. Ao reverter a conjugação de ubiquitina, o USP51 pode influenciar a proteostase e a dinâmica de complexos multiproteicos, com efeitos a jusante na progressão do ciclo celular, nas respostas a danos no DNA e na sinalização adaptativa ao estresse. A atividade alterada de desubiquitinases é frequentemente associada à desregulação do sistema ubiquitina–proteassoma observada na biologia do câncer e em outros distúrbios que envolvem instabilidade genômica ou sinalização aberrante. Portanto, o USP51 é de interesse para dissecar a regulação de vias dependentes de ubiquitina e identificar dependências específicas de contexto em modelos de células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP51 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene USP51 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do USP51, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do USP51 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP51.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de USP51 para a investigação da sinalização de USP51, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) USP51 críticos para a função USP51
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos USP51 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo USP51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo USP51 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus USP51. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo USP51 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR USP51 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia USP51 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo USP51 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.