USP43 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416563-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP43O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP43 (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP43 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP43. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:USP43 Anticorpo (C-8): sc-398436
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP43 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP43 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A USP43 humana codifica uma enzima desubiquitinante no sistema ubiquitina–proteassoma, que regula a estabilidade proteica e a sinalização ao remover ubiquitina de proteínas substrato. Como uma protease específica de ubiquitina, a USP43 está ligada ao controle da proteostase e pode influenciar respostas ao estresse celular, a progressão do ciclo celular e a integridade do genoma por meio da modulação da degradação dependente de ubiquitina. Alterações na dinâmica de desubiquitinação são frequentemente associadas a respostas desreguladas a danos no DNA e a fenótipos de proliferação aberrantes observados em múltiplos contextos de doença. Estudar a função da USP43 ajuda a esclarecer como enzimas desubiquitinantes moldam redes de sinalização por ubiquitina e vias transcricionais e de reparo a jusante.
USP43 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP43 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP43. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP43. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP43 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.