USP22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432127

Visão geral

Usp22 codifica a enzima desubiquitinante USP22, um componente catalítico do complexo coativador transcricional SAGA que remove ubiquitina da histona H2B e de outros substratos para influenciar a acessibilidade da cromatina e programas de expressão gênica. Por meio da regulação do alongamento transcricional, da progressão do ciclo celular e das respostas a danos no DNA, a USP22 ajuda a coordenar proliferação, diferenciação e a manutenção da integridade do genoma. A atividade de USP22 se conecta a vias de controle epigenético e à proteostase dependente de ubiquitina, moldando saídas de sinalização específicas do contexto que são frequentemente alteradas em estados transcricionais relevantes para o câncer. Assinaturas de expressão gênica associadas à USP22 e desreguladas têm sido relacionadas à agressividade tumoral e a fenótipos semelhantes a células-tronco, sustentando sua utilidade em estudos mecanísticos de transcrição oncogênica e plasticidade epigenética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP22 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Usp22 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Usp22, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Usp22 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP22.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Usp22 para a investigação da sinalização de USP22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Usp22 críticos para a função USP22
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Usp22 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo USP22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo USP22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Usp22. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo USP22 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR USP22 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Usp22 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Usp22 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.