USP2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424700

개요

Usp2는 유비퀴틴 의존적 단백질 분해를 되돌려 단백질 항상성(proteostasis)과 신호 지속 시간을 조절하는 탈유비퀴틴화 효소인 유비퀴틴-특이적 펩티다아제 2(USP2)를 암호화한다. USP2는 특정 기질에 결합된 유비퀴틴 사슬을 절단함으로써 세포주기 진행, 세포사멸, DNA 손상 반응, 염증성 신호전달과 같은 과정들을 조절하며, 대사 및 생체시계(서카디안) 프로그램의 조절과도 연관되어 있다. USP2 활성이 변화하면 실험 모델에서 성장 조절 이상 및 스트레스 적응 이상과 같은 표현형과 연관되는 것으로 보고되어, 세포 항상성에 대한 유비퀴틴–프로테아좀 시스템의 제어를 탐구하는 데 유용한 표적(node)로 간주된다. 마우스 시스템에서는 Usp2의 교란을 통해 조직 및 면역 관련 맥락에서 탈유비퀴틴화가 경로 간 크로스토크를 어떻게 미세 조정하는지 연구하는 데 흔히 활용된다.

USP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Usp2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Usp2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Usp2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 USP2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 USP2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Usp2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• USP2 기능에 중요한 Usp2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Usp2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• USP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 USP2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Usp2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  USP2 HDR 플라스미드 (m) 및 USP2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Usp2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Usp2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.