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USP17L2CRISPR激活质粒(h) | sc-417603-ACT | 20 µg | $397.00 |
USP17L2(泛素特异性肽酶17样家族成员2)是一种人类去泛素化酶,通过从靶底物上去除泛素参与调控蛋白稳定性与信号传导的动态变化。作为泛素–蛋白酶体系统的一部分,USP17家族成员与细胞周期进程的控制、受体与激酶信号传导,以及通过对泛素依赖性通路进行精细调节来调控先天免疫和炎症反应有关。去泛素化的改变可重塑MAPK/ERK与NF-κB相关的程序,影响细胞增殖、应激反应与转录输出。包含USP17旁系同源物在内的泛素信号网络失衡,常在肿瘤生物学与免疫相关疾病机制研究中被探讨,作为一种具有情境依赖性的因素,可能促成异常的细胞信号传导。
USP17L2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性USP17L2的表达。
USP17L2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的USP17L2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于USP17L2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性USP17L2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的USP17L2位点,并能够研究内源性位点上依赖于USP17L2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在USP17L2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟USP17L2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。