USP14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425567
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP14 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico USP14, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:USP14 Anticorpo (6E6): sc-100630
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425567 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Usp14 codifica a peptidase 14 específica de ubiquitina (USP14), uma enzima desubiquitinante associada ao proteassoma que encurta cadeias de ubiquitina e regula o processamento de substratos no proteassoma 26S. Ao modular a reciclagem de ubiquitina e a renovação proteica, a USP14 influencia a proteostase, as respostas ao stress e os resultados de sinalização ligados à degradação dependente de ubiquitina. Em células de rato, alterações na atividade da USP14 têm sido associadas a perturbações na manutenção neuronal e na função sináptica, em linha com a importância de uma dinâmica equilibrada do proteassoma na neurobiologia. A USP14 também se cruza com vias que controlam a qualidade das proteínas e a homeostase celular, o que a torna relevante para estudos mecanísticos da disfunção do sistema ubiquitina–proteassoma.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO USP14 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Usp14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Usp14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Usp14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína USP14.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Usp14 para a investigação da sinalização de USP14, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Usp14 críticos para a função USP14
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Usp14 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo USP14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo USP14 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Usp14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo USP14 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR USP14 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Usp14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Usp14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.