urocortin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406580
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- urocortin III O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico urocortin III, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:urocortin III Anticorpo (C3): sc-517449
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
urocortin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406580 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
UCN3 codifica a urocortina III, um neuropeptídeo secretado da família do fator liberador de corticotropina (CRF) que sinaliza preferencialmente por meio do CRHR2 para modular programas transcricionais dependentes de cAMP/PKA. Em tecidos neurais e periféricos, a urocortina III contribui para a regulação da fisiologia adaptativa ao estresse, do balanço energético e da atividade autonômica, conectando sinais neuroendócrinos à homeostase metabólica e cardiovascular. A atividade da via do CRHR2 influenciada por UCN3 tem sido estudada em contextos de fenótipos relacionados ao estresse, controle da glicose e função vascular, tornando o UCN3 um nó útil para dissecar a sinalização de hormônios peptídicos e a biologia seletiva por receptor da família CRF. Dinâmicas alteradas de sinalização UCN3/CRHR2 têm sido associadas à desregulação neuroendócrina e metabólica em modelos experimentais, sustentando sua relevância para pesquisas mecanísticas de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO urocortin III (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UCN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UCN3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UCN3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína urocortin III.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UCN3 para a investigação da sinalização de urocortin III, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UCN3 críticos para a função urocortin III
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UCN3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo urocortin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo urocortin III Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UCN3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo urocortin III Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR urocortin III (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UCN3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UCN3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.