UNKL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-413020-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UNKLO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UNKL (h) e o Plasmídeo Double Nickase UNKL (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UNKL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UNKL Anticorpo (F-8): sc-398716
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UNKL Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-413020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UNKL Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-413020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UNKL codifica uma proteína humana pouco caracterizada, que se acredita participar da organização intracelular e de processos associados a membranas, com evidências emergentes de ligações à regulação dependente de ubiquitina da estabilidade e do tráfego de proteínas. Com base em domínios previstos e em relatos funcionais limitados, a UNKL pode influenciar a proteostase e os resultados de sinalização ao modular a degradação ou a localização de proteínas cliente específicas. A regulação alterada dessas vias pode afetar transições de estado celular, respostas ao estresse e controle do crescimento, tornando a UNKL um alvo de interesse em estudos em nível de sistemas sobre a conectividade de vias. Conjuntos de dados de expressão e de associações genéticas sugeriram relevância potencial para a biologia de doenças, inclusive em contextos em que a homeostase proteica e a sinalização desreguladas contribuem para disfunção celular.
UNKL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UNKL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UNKL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UNKL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UNKL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.