Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UMPS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423609
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UMPS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UMPS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UMPS Anticorpo (A-9): sc-398086
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UMPS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423609 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Umps codifica a uridina monofosfato sintetase (UMPS), uma enzima bifuncional que catalisa as etapas finais da biossíntese de pirimidinas de novo, convertendo orotato em UMP por meio das atividades de orotato fosforribosiltransferase e de descarboxilase de orotidina-5′-fosfato. A UMPS sustenta a homeostase do pool de nucleotídeos, necessária para a replicação do DNA, a síntese de RNA e a progressão do ciclo celular, conectando o metabolismo de pirimidinas à capacidade proliferativa e à estabilidade do genoma. A perturbação da função da UMPS afeta indiretamente as redes metabólicas de um carbono e acopladas ao folato, por alterar a demanda por nucleotídeos, e pode remodelar as respostas celulares ao estresse de replicação. A desregulação das vias de síntese de pirimidinas é amplamente relevante para estudos de mecanismos de doenças metabólicas e de fenótipos proliferativos em sistemas mamíferos, incluindo modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UMPS (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Umps em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Umps, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Umps na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UMPS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Umps para a investigação da sinalização de UMPS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Umps críticos para a função UMPS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Umps para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UMPS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UMPS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Umps. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UMPS Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UMPS (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Umps para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Umps definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.