ULBP3 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-403608-ACT

ULBP3（UL16結合タンパク質3）は、細胞ストレスにより誘導されるGPIアンカー型のリガンドであり、NK細胞および一部のT細胞に発現する活性化受容体NKG2D（KLRK1）に結合します。ULBP3がNKG2Dに結合することで、細胞ストレス、DNA損傷応答、悪性形質転換といった状況における免疫監視や、細胞傷害性リンパ球の活性化に寄与します。その発現は、炎症性シグナルやストレス経路によって調節され、抗原非依存的な異常細胞の認識・排除に影響します。ULBP3の制御異常は複数のがん種や免疫介在性疾患で報告されており、免疫回避や腫瘍—免疫相互作用を機序的に読み解く指標としての活用が支持されています。

ULBP3 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性ULBP3の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

ULBP3 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における ULBP3 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はULBP3転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性ULBP3の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のULBP3遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるULBP3依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびULBP3発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるULBP3経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。