UGT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405110-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UGT8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UGT8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UGT8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UGT8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UGT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405110-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UGT8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405110-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O UGT8 humano codifica a UDP-galactose:ceramida galactosiltransferase, uma enzima associada ao Golgi que catalisa a formação de galactosilceramida a partir de ceramida e UDP-galactose, iniciando etapas-chave da biossíntese de glicosfingolipídios. Essa atividade sustenta a composição lipídica da mielina, a organização de microdomínios de membrana e processos de sinalização ligados à diferenciação de oligodendrócitos e à homeostase neural. A remodelação lipídica dependente de UGT8 interage com o metabolismo da ceramida e com vias mais amplas de esfingolipídios que regulam respostas ao estresse e decisões de destino celular. A expressão alterada de UGT8 ou o desequilíbrio de galactosilceramida tem sido associado a contextos desmielinizantes e neurodegenerativos e também tem sido investigado na reprogramação metabólica relacionada ao câncer, tornando-o relevante para estudos mecanísticos focados em vias.
UGT8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UGT8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UGT8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UGT8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UGT8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.