UGT2B5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423603

概要

マウスUGT2B5は小胞体局在のUDP-グルクロン酸転移酵素であり、疎水性基質にグルクロン酸を抱合して水溶性を高め、排泄を促進します。この第II相代謝活性は異物のクリアランスを支えるとともに、グルクロン酸抱合（グルクロン酸化）を介して内因性の低分子の恒常性維持にも寄与します。UGT2Bファミリー酵素は肝臓および肝外組織の解毒プログラムと連動しており、基質の利用可能性や代謝物プロファイルを調節することで、化学物質曝露に対する細胞応答を形作り得ます。グルクロン酸抱合能の変化は、毒性学、炎症に関連した代謝リプログラミング、ならびに遺伝子型依存的な薬物処理や化学物質感受性の個体差といった文脈で、しばしば検討されます。

UGT2B5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUgt2b5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ugt2b5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ugt2b5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UGT2B5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UGT2B5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ugt2b5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UGT2B5の機能に不可欠なUgt2b5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ugt2b5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UGT2B5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUGT2B5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ugt2b5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UGT2B5 HDRプラスミド（m）および UGT2B5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUgt2b5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUgt2b5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。