UGT2A1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-407270-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- UGT2A1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- UGT2A1ダブルニカースプラスミド（h）およびUGT2A1ダブルニカースプラスミド（h2）は、UGT2A1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
UGT2A1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-407270-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UGT2A1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-407270-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UGT2A1は、多様な低分子のグルクロン酸抱合（グルクロン酸化）を触媒する小胞体局在型のUDP-グルクロン酸転移酵素をコードしており、基質の水溶性を高めることで解毒および排泄を促進します。この第II相代謝活性は、上皮組織における外因性（キセノバイオティクス）および内因性（エンドバイオティクス）化合物のクリアランス経路と連動し、局所の化学物質曝露や細胞のストレス応答に影響を与えます。UGT2A1の発現量や活性の変動はグルクロニド抱合体のプロファイルを変化させ得ることが知られており、におい物質（odorant）の代謝や、化学物質による上皮障害への感受性との関連で研究されています。そのためUGT2A1は、組織特異的な抱合能と、それに伴うレドックスバランスおよび炎症シグナル伝達への下流影響を解析するうえで有用な標的です。
UGT2A1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における UGT2A1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、UGT2A1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、UGT2A1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、UGT2A1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。