Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
UDG Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403189-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UDGO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UDG (h) e o Plasmídeo Double Nickase UDG (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UNG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UDG Anticorpo (B-7): sc-390255
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UDG Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UDG Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O UNG humano codifica a uracil-DNA glicosilase (UDG), um iniciador-chave do reparo por excisão de bases que remove uracila do DNA resultante da desaminação da citosina ou da incorporação incorreta de dUTP. Ao gerar sítios abásicos que são posteriormente processados por endonucleases AP, polimerases e ligases, o UNG ajuda a manter a integridade do genoma durante a replicação e o reparo do DNA. A atividade do UNG também se cruza com processos de diversificação de anticorpos em células B ao moldar o processamento de lesões de uracila introduzidas durante a hipermutação somática e a recombinação de troca de classe. O processamento desregulado de uracila e o reparo por excisão de bases comprometido têm sido associados a um aumento da carga mutacional e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia do câncer e para modelos de dano ao DNA associado à inflamação.
UDG O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UNG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UNG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UNG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UNG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.