Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UCH-L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401088-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UCH-L1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UCH-L1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UCH-L1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UCHL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UCH-L1 Anticorpo (C-4): sc-271639
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UCH-L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401088-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UCH-L1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401088-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UCHL1 codifica a hidrolase de ubiquitina C-terminal L1 (UCH-L1), uma enzima desubiquitinante enriquecida em neurónios que mantém a homeostase da ubiquitina e influencia o controlo de qualidade proteica através do sistema ubiquitina–proteassoma. Ao processar conjugados de ubiquitina e ao regular a degradação de determinados substratos, a UCH-L1 afeta a função sináptica, a integridade axonal e as respostas ao stress celular, com efeitos a jusante nas redes de proteostase. A desregulação da expressão ou da atividade de UCHL1 tem sido associada a fenótipos neurodegenerativos e a alterações na resiliência neuronal, e a UCH-L1 é amplamente utilizada como marcador em estudos de diferenciação neural e de lesão neuronal. Estas características tornam o UCHL1 um alvo relevante para dissecar mecanismos que ligam a desubiquitinação, a manutenção do proteoma e a vulnerabilidade neuronal.
UCH-L1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UCHL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UCHL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UCHL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UCHL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.