Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UBE2J1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405892
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UBE2J1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UBE2J1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UBE2J1 Anticuerpo (B-6): sc-377002
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UBE2J1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405892 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
UBE2J1 codifica una enzima E2 conjugadora de ubiquitina anclada al retículo endoplásmico (RE) que coopera con ligasas E3 para ubiquitinar sustratos mal plegados o regulados y dirigirlos a la degradación proteasomal. Participa en la degradación asociada al RE (ERAD), conectando el control de calidad proteico con la actividad del sistema ubiquitina–proteasoma y el mantenimiento de la homeostasis del RE durante el estrés celular. Al modular la proteostasis, UBE2J1 influye en vías relacionadas con la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), la maduración de proteínas secretoras y el recambio de proteínas asociadas a membrana. La desregulación de componentes de ERAD, incluido UBE2J1, es relevante en la investigación de trastornos caracterizados por estrés proteotóxico y alteraciones en el recambio de proteínas mediado por ubiquitina.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UBE2J1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UBE2J1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UBE2J1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UBE2J1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UBE2J1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UBE2J1 para la investigación de la señalización de UBE2J1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de UBE2J1 críticos para la función de UBE2J1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UBE2J1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UBE2J1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UBE2J1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UBE2J1 (h) y el plásmido HDR UBE2J1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UBE2J1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UBE2J1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.