Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406582-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UBE2FO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UBE2F (h) e o Plasmídeo Double Nickase UBE2F (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UBE2F. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UBE2F Anticorpo (C-11): sc-398668
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBE2F Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O UBE2F humano codifica uma enzima conjugadora do tipo E2 que direciona o NEDD8 para substratos cullin, apoiando a montagem e a regulação das ligases cullin–RING e a proteostase a jusante dependente de ubiquitina. Ao moldar o estado de neddilação de cullins específicos, o UBE2F influencia a degradação de reguladores-chave da progressão do ciclo celular, das respostas ao estresse e da sinalização de dano ao DNA, impactando assim programas transcricionais e a homeostase celular. Vias desreguladas de ubiquitina–proteassoma e de neddilação são frequentemente implicadas na transformação oncogênica e em alterações da tolerância ao estresse, tornando o UBE2F um nó útil para estudos mecanísticos de controle de qualidade proteica e de crosstalk entre vias de sinalização. A investigação funcional do UBE2F pode ajudar a esclarecer como a neddilação seletiva de cullins direciona o reconhecimento de substratos e os desfechos proteolíticos em células humanas.
UBE2F O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UBE2F em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UBE2F. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UBE2F. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UBE2F interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.