Ub-RPS27A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416542-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ub-RPS27AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ub-RPS27A (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ub-RPS27A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RPS27A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ub-RPS27A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416542-NIC | 20 µg | $410.00 |
O RPS27A codifica uma proteína de fusão que é processada pós-traducionalmente para gerar ubiquitina e a proteína ribossomal 40S S27a, conectando a proteostase dependente de ubiquitina à biogênese ribossomal e à tradução. A ubiquitina produzida a partir de Ub-RPS27A contribui para a renovação/degradação de proteínas por meio do sistema ubiquitina–proteassoma, para a regulação da sinalização de dano ao DNA e para a remodelação do proteoma em resposta ao estresse. O componente S27a é incorporado à subunidade ribossomal menor e auxilia a decodificação do mRNA e a capacidade translacional global. A desregulação de proteínas ribossomais e da homeostase de ubiquitina está implicada em alterações no controle do crescimento celular, em respostas ao estresse proteotóxico e em vias de manutenção do genoma relevantes para pesquisas em câncer e neurodegeneração.
Ub-RPS27A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RPS27A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RPS27A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RPS27A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RPS27A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.