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twist慢病毒激活颗粒(h) | sc-400108-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
twist慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400108-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
TWIST1 编码 Twist 蛋白,这是一种基础螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子,可调控间充质谱系的命运决定、形态发生以及上皮–间充质转化(EMT)程序。Twist 将发育相关的转录网络与 TGF-β、WNT/β-连环蛋白和 PI3K/AKT 等信号通路整合起来,从而调节细胞命运选择、生存以及与运动能力相关的基因表达。在多种癌症背景中,TWIST1 表达失调与分化状态改变、侵袭性增强和干细胞样表型相关;而其生殖系受损则与颅颌面发育障碍有关,包括 Saethre–Chotzen 综合征。这些特性使 TWIST1 成为研究人类细胞中可塑性、谱系转换以及微环境应答的转录调控机制的关键节点。
twist 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TWIST1 表达。
twist 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TWIST1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性twist表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TWIST1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。