Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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TWEAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423449
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TWEAK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TWEAK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TWEAK Anticorpo (MTW-1): sc-56251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TWEAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423449 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Tnfsf12** de camundongo codifica a **TWEAK** (*TNF-like weak inducer of apoptosis*), uma citocina transmembrana do tipo II da superfamília do TNF que pode ser liberada como ligante solúvel e sinaliza principalmente por meio do receptor **FN14/Tnfrsf12a**. A interação **TWEAK–FN14** regula programas gênicos inflamatórios e o remodelamento tecidual ao ativar as vias **NF-κB** canônica e não canônica e ao modular a sinalização de **MAPK**, influenciando a sobrevivência celular, a apoptose, a proliferação, a migração e respostas angiogênicas. Em camundongos, esse eixo está implicado em interações entre células imunes e estroma e em respostas a lesão, sendo frequentemente estudado em contextos de inflamação crônica, fibrose, neuroinflamação e remodelamento do microambiente tumoral. Como a TWEAK integra a sinalização de citocinas com processos de reparo, ela constitui um ponto útil para dissecar a comunicação cruzada entre mediadores inflamatórios e a dinâmica da matriz extracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TWEAK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfsf12 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfsf12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfsf12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TWEAK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfsf12 para a investigação da sinalização de TWEAK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfsf12 críticos para a função TWEAK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfsf12 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TWEAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TWEAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfsf12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TWEAK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TWEAK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfsf12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfsf12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.