TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423540

Visão geral

Ttf1 (TTF1/Fator 1 de Terminação da Transcrição) é uma proteína de ligação ao DNA específica de sequência que atua como fator de terminação da transcrição e como barreira à forquilha de replicação em repetições de DNA ribossômico (rDNA). Em células de camundongo, a TTF1 ajuda a organizar a cromatina nucleolar, coordena a transcrição pela RNA polimerase I com o processamento de rRNA e sustenta a estabilidade do genoma ao regular conflitos entre replicação e transcrição no rDNA. Por meio dessas funções, a TTF1 contribui para a homeostase nucleolar e para a biogênese de ribossomos, processos intimamente ligados à proliferação e às respostas ao estresse celular. A desregulação do controle da transcrição de rDNA e da função nucleolar é frequentemente implicada em programas de crescimento oncogênico e em fenótipos mais amplos de instabilidade genômica, tornando Ttf1 um alvo relevante em estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ttf1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ttf1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ttf1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TTF/Transcription Termination Factor/TTF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ttf1 para a investigação da sinalização de TTF/Transcription Termination Factor/TTF1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ttf1 críticos para a função TTF/Transcription Termination Factor/TTF1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ttf1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ttf1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TTF/Transcription Termination Factor/TTF1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ttf1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ttf1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.