TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400458

Visão geral

NKX2-1 (TTF-1, fator de transcrição da tiroide 1) codifica um fator de transcrição homeobox com capacidade de ligação ao DNA, que estabelece e mantém programas de linhagem durante o desenvolvimento e na tiroide adulta, no epitélio pulmonar e no prosencéfalo ventral. Regula redes génicas que controlam a diferenciação epitelial, a homeostase do surfactante e a morfogénese dos órgãos, coordenando estados transcricionais que se cruzam com vias de sinalização do desenvolvimento como Wnt, BMP e FGF. Na biologia das doenças humanas, alterações na dosagem de NKX2-1 ou mutações estão associadas a fenótipos congénitos cérebro–pulmão–tiroide e contribuem para uma reprogramação transcricional dependente do contexto na patologia pulmonar e tiroideia. Por atuar como regulador mestre da identidade celular, o NKX2-1 é frequentemente estudado em modelos de diferenciação, transições de estado epitelial e mecanismos de dependência de linhagem oncogénica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NKX2-1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NKX2-1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NKX2-1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NKX2-1 para a investigação da sinalização de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NKX2-1 críticos para a função TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NKX2-1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NKX2-1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NKX2-1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NKX2-1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.