TSSK 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423531

Descripción general

Tssk1 codifica la quinasa 1 de serina/treonina específica de testículo (TSSK1), una quinasa restringida a las células germinales que actúa en la espermatogénesis posmeiótica. TSSK1 contribuye a procesos de diferenciación espermática como la remodelación de la cromatina, el ensamblaje del flagelo y la maduración de las espermátidas mediante señalización dependiente de la fosforilación en el testículo. La alteración de la actividad de las quinasas de la familia TSSK se ha asociado con un desarrollo espermático deficiente y con fenotipos de subfertilidad/infertilidad masculina en sistemas modelo. Como gen murino con expresión testicular altamente enriquecida, Tssk1 se estudia con frecuencia para definir vías reguladas por quinasas que controlan el desarrollo de las células germinales y la aptitud reproductiva.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TSSK 1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tssk1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tssk1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tssk1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TSSK 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tssk1 para la investigación de la señalización de TSSK 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tssk1 críticos para la función de TSSK 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tssk1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TSSK 1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TSSK 1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tssk1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TSSK 1 (m) y el plásmido HDR TSSK 1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tssk1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tssk1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.