Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TSG-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423437
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TSG-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TSG-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TSG-6 Anticorpo (A38.1.20): sc-65886
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TSG-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423437 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tnfaip6 codifica a proteína 6 induzida por fator de necrose tumoral‑α (TSG‑6), uma proteína secretada que se liga ao hialuronano e remodela a matriz extracelular durante a inflamação e a lesão tecidual. A TSG‑6 catalisa a transferência de cadeias pesadas do inibidor inter‑α para o hialuronano, promovendo a formação de matrizes estáveis ricas em HA que influenciam a adesão de leucócitos, a migração celular e a resolução das respostas inflamatórias. Em sistemas murinos, a TNFAIP6 é rapidamente induzida a jusante de sinais pró-inflamatórios, como TNF/NF‑κB, e modula a atividade de quimiocinas, redes de proteases e a organização da matriz. Alterações desreguladas na biologia TSG‑6/HA foram associadas a modelos de artrite, inflamação pulmonar e intestinal, reparo de feridas e fibrose, sustentando seu uso como um nó mecanístico que conecta a sinalização por citocinas à dinâmica da MEC.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSG-6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfaip6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfaip6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfaip6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSG-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfaip6 para a investigação da sinalização de TSG-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfaip6 críticos para a função TSG-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfaip6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TSG-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSG-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfaip6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TSG-6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSG-6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfaip6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfaip6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.