Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TrpRS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423692
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TrpRS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TrpRS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TrpRS Anticorpo (C-7): sc-374401
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TrpRS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423692 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Wars codifica a sintetase de triptofanil-tRNA (TrpRS), uma aminoacil-tRNA sintetase citosólica que liga L-triptofano ao seu tRNATrp cognato, fornecendo o tRNA carregado necessário para a tradução precisa do mRNA. Ao controlar o carregamento de tRNA e apoiar o alongamento ribossomal, a TrpRS ajuda a acoplar a disponibilidade de nutrientes à síntese proteica e a programas celulares de adaptação ao estresse. A perturbação da atividade de aminoacil-tRNA sintetases pode influenciar a proteostase, a sinalização integrada de estresse e a fidelidade translacional, processos frequentemente implicados em inflamação, neurodegeneração e transformação oncogênica. Assim, o Wars de camundongo é um alvo útil para estudar como a alteração da capacidade de tradução remodela o estado celular e fenótipos relevantes para doenças in vitro e in vivo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TrpRS (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Wars em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Wars, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Wars na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TrpRS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Wars para a investigação da sinalização de TrpRS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Wars críticos para a função TrpRS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Wars para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TrpRS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TrpRS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Wars. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TrpRS Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TrpRS (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Wars para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Wars definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.