TRPM4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427134-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRPM4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRPM4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TRPM4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Trpm4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRPM4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427134-NIC | 20 µg | $410.00 |
Trpm4 codifica o TRPM4, um canal de cátions ativado por Ca2+ e seletivo para íons monovalentes, que conduz Na+ para despolarizar a membrana plasmática sem transportar Ca2+ diretamente. Ao moldar o potencial de membrana, o TRPM4 modula indiretamente a entrada de Ca2+ e influencia o acoplamento excitação–contração, a ativação de células imunes e a sinalização secretória a jusante da liberação de Ca2+ dependente de PLC/IP3. Em tecidos de camundongo, a atividade do TRPM4 tem sido associada à regulação da condução e contratilidade cardíacas, do tônus do músculo liso e de programas de sinalização inflamatória. Assim, alterações na função do TRPM4 são estudadas em modelos de eletrofisiologia relacionada a arritmias, disfunção vascular e patologia mediada pelo sistema imune.
TRPM4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Trpm4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Trpm4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Trpm4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Trpm4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.