TRPC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401205
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRPC6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRPC6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRPC6 Anticorpo (B-10): sc-515837
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRPC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401205 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O TRPC6 codifica um canal catiônico não seletivo da família dos potenciais receptores transitórios canônicos (TRPC), que medeia o influxo de Ca²⁺ operado por receptor na membrana plasmática. A atividade do canal é comumente acoplada à sinalização dependente de PLC a jusante de GPCRs e de receptores tirosina-quinase, moldando a dinâmica citosólica de Ca²⁺ que regula respostas transcricionais, remodelamento do citoesqueleto e motilidade celular. Em tecidos humanos, o TRPC6 contribui para a entrada de cálcio mecanossensível e responsiva ao diacilglicerol, com ativação subsequente de vias como calcineurina–NFAT e sinalização MAPK. A desregulação da função do TRPC6 tem sido implicada na biologia de podócitos renais e em mecanismos de doença glomerular, bem como em processos cardiovasculares e neuroinflamatórios, sustentando sua utilidade como alvo para dissecação de vias em modelos baseados em células.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRPC6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRPC6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRPC6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRPC6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRPC6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRPC6 para a investigação da sinalização de TRPC6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRPC6 críticos para a função TRPC6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRPC6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRPC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRPC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRPC6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRPC6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRPC6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRPC6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRPC6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.