Tropomyosin β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401580-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Tropomyosin βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Tropomyosin β (h) e o Plasmídeo Double Nickase Tropomyosin β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TPM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tropomyosin β Anticorpo (3C8): sc-293374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Tropomyosin β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401580-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Tropomyosin β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401580-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TPM2 codifica a tropomiosina beta humana, uma proteína de ligação à actina do tipo coiled-coil que se polimeriza ao longo da actina filamentosa para estabilizar os microfilamentos e modular o acesso dos motores de miosina, moldando assim a contratilidade e a dinâmica do citoesqueleto. Ao regular as interações actina–miosina, a TPM2 contribui para a organização do sarcômero no músculo e influencia processos como morfologia celular, migração e mecanotransdução por meio do citoesqueleto de actina. Alterações na função ou na expressão de TPM2 têm sido associadas a miopatias hereditárias e fenótipos de contratura, refletindo o papel da proteína na manutenção da regulação adequada dos filamentos finos. Como regulador do citoesqueleto, a TPM2 é frequentemente estudada em vias que conectam a montagem de filamentos de actina, a geração de força e a sinalização dependente do citoesqueleto.
Tropomyosin β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TPM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TPM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TPM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TPM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.