Trk A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400188-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Trk AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Trk A (h) e o Plasmídeo Double Nickase Trk A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NTRK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Trk A Anticorpo (Y32Ex): sc-80398
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Trk A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400188-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Trk A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400188-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O NTRK1 codifica a tirosina-quinase receptora humana TrkA, o receptor de alta afinidade para o fator de crescimento nervoso (NGF), que regula a sobrevivência neuronal, a diferenciação e o crescimento axonal. A dimerização e a autofosforilação de TrkA induzidas pelo ligante ativam a sinalização a jusante pelas vias MAPK/ERK, PI3K/AKT e PLCγ, coordenando programas transcricionais e processos dependentes de cálcio. A disfunção de NTRK1 está associada a alterações no desenvolvimento de neurônios sensoriais e simpáticos e é implicada em transtornos do neurodesenvolvimento, enquanto a sinalização aberrante de Trk pode contribuir para a ativação de vias oncogênicas em contextos celulares relevantes para doenças. Como resultado, o NTRK1 é amplamente estudado em neurobiologia, transdução de sinais e em modelos que avaliam fenótipos dependentes de fatores de crescimento.
Trk A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NTRK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NTRK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NTRK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NTRK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.