Trio Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401231
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Trio O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Trio, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Trio Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401231 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TRIO codifica a Trio, um grande fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) da família Rho, com múltiplos domínios, que ativa as GTPases Rac1 e RhoA para coordenar a remodelação do citoesqueleto de actina, o tráfego de membranas e a polaridade celular. Trio integra sinais provenientes de receptores de superfície celular com vias a jusante que regulam o crescimento de neuritos, a orientação axonal e a organização de sinapses, além de exercer funções adicionais na migração e adesão celular. A desregulação da sinalização de TRIO e variantes que afetam a atividade GEF têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e a alterações no comportamento da rede de GTPases Rho em diversos contextos celulares, tornando-o um nó útil para estudar o controle do citoesqueleto e a integração de sinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Trio (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIO em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIO, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIO na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Trio.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIO para a investigação da sinalização de Trio, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIO críticos para a função Trio
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIO para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Trio Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Trio Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIO. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Trio Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Trio (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIO para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIO definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.