Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404916-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRIM8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRIM8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRIM8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRIM8 Anticorpo (B-3): sc-398878
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404916-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404916-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM8 (motivo tripartite contendo 8) codifica uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING que regula a renovação de proteínas e a amplitude de sinalização em vias de imunidade inata e de resposta ao estresse. O TRIM8 tem sido associado à modulação da sinalização de NF-κB e de vias ligadas ao interferon, podendo influenciar programas transcricionais por meio do controle, dependente de ubiquitina, de componentes de vias e de fatores nucleares. No núcleo e no citoplasma, o TRIM8 contribui para o controle de qualidade proteica e para a regulação dependente do contexto de respostas relacionadas ao ciclo celular e à apoptose. Alterações na expressão ou na função de TRIM8 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e renais, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos de sinalização por ubiquitina e regulação inflamatória.
TRIM8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRIM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRIM8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRIM8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRIM8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.