TRIM37 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407390-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM37O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRIM37 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRIM37 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRIM37. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRIM37 Anticorpo (C-6): sc-515044
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM37 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407390-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM37 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407390-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM37 codifica uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING da família TRIM, que regula a ubiquitinação de proteínas, a proteostase e processos associados ao ciclo celular. A TRIM37 localiza-se em compartimentos citoplasmáticos e perinucleares e tem sido associada à regulação do centrossomo e do material pericentriolar, influenciando a estabilidade do genoma e a fidelidade mitótica. Por meio do controlo dependente de ubiquitina de proteínas de sinalização e estruturais, a TRIM37 interliga-se com vias que governam as respostas a danos no DNA, a proliferação celular e a adaptação ao stress. A atividade desregulada da TRIM37 está associada a síndromes do desenvolvimento e tem sido descrita em contextos de controlo de crescimento alterado e instabilidade genómica, reforçando a sua relevância para estudos mecanísticos em biologia de doenças.
TRIM37 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRIM37 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRIM37. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRIM37. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRIM37 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.