TRIM34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417920

Visão geral

TRIM34 codifica uma ligase E3 de ubiquitina com motivo tripartido da família TRIM, implicada na regulação da imunidade inata e na restrição antiviral. Por meio dos seus domínios RING, B-box e coiled-coil, a TRIM34 pode influenciar a sinalização dependente de ubiquitina e a degradação/reciclagem de proteínas, modulando vias como as respostas estimuladas por interferon e a sinalização de recetores de reconhecimento de padrões. A atividade alterada de proteínas da família TRIM é frequentemente associada a inflamação desregulada e a interações hospedeiro–patógeno, tornando a TRIM34 relevante para o estudo de mecanismos que modulam a homeostase imunitária. A TRIM34 também é utilizada como regulador candidato em análises em nível de sistemas da biologia de infeções e de fenótipos de doenças associadas ao sistema imunitário.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRIM34 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRIM34 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRIM34, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRIM34 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRIM34.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRIM34 para a investigação da sinalização de TRIM34, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRIM34 críticos para a função TRIM34
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRIM34 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TRIM34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRIM34 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRIM34. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TRIM34 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRIM34 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRIM34 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRIM34 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.