TREX-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423502

Visão geral

Trex1 codifica a TREX-1, uma exonuclease de DNA 3′→5′ que degrada DNA citosólico aberrante originado de retroelementos endógenos, estresse replicativo ou dano ao DNA, limitando assim a ativação indevida de sensores da imunidade inata. Ao conter a sinalização cGAS–STING e os programas transcricionais de interferon tipo I a jusante, a TREX-1 ajuda a manter a homeostase imune e previne respostas inflamatórias crônicas contra ácidos nucleicos próprios. Em sistemas murinos, a perda de Trex1 é comumente usada para modelar autoinflamação impulsionada por ácidos nucleicos e para investigar mecanismos que conectam instabilidade genômica, vias de morte celular e expressão de genes estimulados por interferon. A atividade da TREX-1 também se relaciona com processos de reparo do DNA e associados à replicação, o que a torna relevante para estudos de estresse genotóxico e vigilância imune.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TREX-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trex1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trex1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trex1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TREX-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trex1 para a investigação da sinalização de TREX-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trex1 críticos para a função TREX-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trex1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TREX-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TREX-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trex1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TREX-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TREX-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trex1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trex1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.