TREM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425490
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TREM-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TREM-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TREM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425490 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O receptor desencadeador expresso em células mieloides 1 (TREM-1) é um imunorreceptor encontrado predominantemente em neutrófilos e monócitos/macrófagos, que amplifica respostas inflamatórias iniciadas por receptores de reconhecimento de padrões. Em camundongos, a sinalização de TREM-1 integra-se a vias mediadas por adaptadores para potencializar a ativação de NF-κB e MAPK, aumentando a produção de citocinas e quimiocinas pró-inflamatórias e reforçando as funções efetoras da imunidade inata. A atividade de Trem1 está intimamente ligada ao recrutamento e à ativação de células mieloides e ao crosstalk com compartimentos endoteliais e estromais durante a inflamação aguda e crônica. A sinalização desregulada de TREM-1 tem sido associada a modelos de doenças inflamatórias e infecciosas, bem como a fenótipos mieloides associados a tumores e a vias de dano tecidual impulsionadas por respostas excessivas de citocinas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TREM-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Trem1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Trem1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Trem1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TREM-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Trem1 para a investigação da sinalização de TREM-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Trem1 críticos para a função TREM-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Trem1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TREM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TREM-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Trem1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TREM-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TREM-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Trem1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Trem1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.