TRAC-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409980-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAC-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRAC-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRAC-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF125. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAC-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAC-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF125 codifica a ligase E3 de ubiquitina humana TRAC-1, uma proteína do tipo RING finger que ajuda a controlar a degradação de proteínas e a amplitude de sinalização em células imunes por meio de vias proteassomais dependentes de ubiquitina. A TRAC-1 tem sido implicada na regulação das respostas de sinalização do receptor de células T e de citocinas, ao modular a estabilidade e o tráfego de componentes de sinalização, moldando assim a ativação, a tolerância e programas transcricionais a jusante. Como parte de redes mais amplas de ubiquitinação, a RNF125 interage com circuitos regulatórios da imunidade inata e adaptativa que influenciam respostas inflamatórias e a função de linfócitos direcionada por antígenos. A atividade desregulada de RNF125/TRAC-1 e padrões de expressão alterados têm sido associados a mecanismos de doenças imunomediadas e inflamatórias, sustentando seu uso como alvo para estudar a homeostase imune e o redirecionamento da sinalização.
TRAC-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF125 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF125. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF125. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF125 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.